对食物中胭脂虫红酸的检测办法主要有高效液相色谱法、分光光度法、毛细管电泳检测法和薄层色谱检测法。
高效液相色谱法
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为活动相,采用高压输液体系,将具有不同极性的单一溶剂或不同份额的混合溶剂、缓冲液等活动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被别离后,进入检测器进行检测,从而完成对试样的剖析 。
分光光度法
分光光度法是经过测定被测物质在特定波长处或必定波长范围内光的吸光度 或发光强度,对该物质进行定性和定量剖析的办法。
准确称取0.15g 胭脂红酸标样,溶于30ml 欢腾的2N的H C l 溶液中,保持欢腾3 0 s,冷却,转移到1 0 0 m l 的容量瓶中,用水稀释至刻度。分别取1 、2 、5 、8 、10ml 于50ml 容量瓶中,蒸馏水定容,在分光光度计上,用1 c m 的比色杯,最大吸收峰4 9 4 n m 测其吸光度,制作规范曲线,一起用0. 06 N HC l 作空白。测定待测样的胭脂红酸含量:称取必定量的待测样,处理同规范曲线制造共同,在分光光度计上测其吸光度。胭脂红酸含量的计算公式如下 :
C(%)=c × 100/W
式中,W 为样品的质量,g ;c 为待测样的溶液
浓度,g / L ;C 为待测样品中胭脂红酸的含量% 。
毛细管电泳检测法
是以弹性石英毛细管为别离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而完成别离的电泳别离剖析办法。
许元红建立了胭脂红酸的毛细管电泳紫外测定办法,以未涂层融硅石英毛细管(1375px×75um)为别离柱。3mmol/L硼砂(PH=8.92)为电泳介质,在别离电压为20kV,紫外检测波长为280nm的条件下,以桂皮酸应用于糖果中胭脂红酸含量的测定,对胭脂虫红的主要成分胭脂红酸进行定量测定,线性范围为3.92-100mg/L;检出限(S/N=3)为2mg/L。此办法简略可行且成果良好 。
薄层色谱检测法
薄层色谱法(TLC),系将适合的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,依据比移值(Rf)与适合的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作比照,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的办法。薄层色谱法是快速别离和定性剖析少量物质的一种很重要的试验技能,也用于跟踪反应进程。
胭脂虫红色素、虫胶色素和红花黄色素在盐酸酸性下,用50%甲醇和正己烷提取,用聚酰胺净化。茜草色素、红花红色素用50%DMF提取,羊羹用50%乙腈提取,用C1 8柱净化。 薄层板用RP-18F254s和高效纤维素板,用三种展开剂组合,可以把天然色素和合成色素很好别离。 本办法的检出限,果冻鱼肉制品乳饮料中胭脂虫红5mg/kg 。